Real Time PCR, ou PCR em Tempo Real é uma técnica revolucionária na genética molecular que trouxe avanços significativos em diversas áreas, incluindo a medicina veterinária. Ela permite a detecção e amplificação de fragmentos específicos de DNA com alta sensibilidade e precisão, sendo uma evolução da PCR convencional. Mas o que exatamente isso significa e como funciona?
O que é Real Time PCR e como ela funciona?
A PCR (Reação em Cadeia da Polimerase) é um processo que imita a replicação natural do DNA, mas realizado in vitro. Seu objetivo é produzir milhares ou até milhões de cópias de uma região específica do DNA, facilitando sua análise em testes laboratoriais. Para isso, é necessário um conjunto de reagentes e condições específicas. Vamos entender as etapas principais:
1. Desnaturação
A mistura de DNA é aquecida a uma temperatura elevada (90º-100ºC), fazendo com que as duas fitas da dupla-hélice se separem. Esse processo é chamado de desnaturação.
2. Anelamento ou Hibridização
A temperatura é reduzida para cerca de 50º-65ºC, permitindo que primers (pequenas sequências de DNA) se liguem às fitas moldes de DNA. Esses primers marcam a região específica que será amplificada.
3. Extensão ou Polimerização
A temperatura é ajustada novamente (60º-75ºC) para que a enzima DNA polimerase inicie a síntese de novas fitas de DNA, adicionando nucleotídeos (dNTPs) complementares à cadeia molde. Esse processo é repetido por 30-40 ciclos, multiplicando exponencialmente o DNA alvo.
A evolução para o Real Time PCR
Diferente da PCR convencional, onde os produtos amplificados só podem ser visualizados após o término do processo, no Real Time PCR a detecção ocorre em tempo real. Isso é possível graças a corantes fluorescentes ou sondas que emitem luz conforme o DNA é amplificado. O equipamento monitoriza essa fluorescência, permitindo que o resultado seja analisado imediatamente.
Benefícios do Real Time PCR:
- Rapidez: Resultados mais rápidos, dispensando eletroforese.
- Precisão: Permite quantificar a quantidade de DNA na amostra.
- Sensibilidade: Detecta mesmo pequenas quantidades de material genético.
Por que o Real Time PCR é importante na medicina veterinária?
Na medicina veterinária, o Real Time PCR é essencial para identificar patógenos como bactérias, vírus, fungos e parasitas de forma rápida e precisa. Ele é amplamente utilizado no diagnóstico de doenças como:
- Leishmaniose;
- Cinomose;
- Anaplasmose;
- FIV (Vírus da Imunodeficiência Felina);
- FeLV (Vírus da Leucemia Felina);
- Entre outras.
Essa tecnologia permite diagnósticos precoces e ajuda no acompanhamento terapêutico, garantindo melhor prognóstico para os animais.
O Real Time PCR é uma ferramenta indispensável para a medicina veterinária moderna. Sua capacidade de detecção rápida, precisa e quantitativa o torna um aliado na identificação de patógenos e no monitoramento de tratamentos. No Labmol Vet, oferecemos serviços de Real Time PCR para diversas doenças, com qualidade e confiabilidade. Solicite seu exame!